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全自動樣品快速研磨儀對水稻葉片的前處理實(shí)驗(yàn)研磨操作

更新時(shí)間:2023-01-04   更新時(shí)間:2023-01-04   點(diǎn)擊次數(shù):958次

  摘要:全自動樣品快速研磨儀對水稻研磨葉片研磨實(shí)驗(yàn)主要目的是滿足分子標(biāo)記輔助育種中基因型鑒定、基因克隆、測序的需要,本研究借用棉簽等具吸附功能的材料代替移液器,依次直接在2種DNA提取液中操作,建立了一種簡單、快速、環(huán)保的水稻葉片DNA提取方法。結(jié)果表明,提取溶液通過PCR擴(kuò)增,滿足基因擴(kuò)增對模板的要求。

  

  同時(shí),對其進(jìn)行了靈敏度測試,稀釋107倍仍然能夠擴(kuò)增出目標(biāo)片段;最后通過PCR、克隆載體連接等分子生物學(xué)手段,驗(yàn)證此方法也滿足測序的需要。本方法能夠在90s內(nèi)完成植物葉片DNA的提取,解決了目前植物基因組DNA提取方法需要離心機(jī)等昂貴特殊設(shè)備、提取步驟繁鎖、提取過程中刺激味大、提取時(shí)間長等問題,有利于大規(guī)模開展分子標(biāo)記輔助育種中材料基因型的鑒定,具有簡單、快速、廉價(jià)、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)。

  

  實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>擬測試全自動樣品快速研磨儀對水稻葉片的前處理研磨效果

  

  1.測試對象:上海凈信全自動樣品快速研磨儀,型號為JXFSTPRP-24L

  

  2.工作原理:樣品(水稻葉片)放入離心管中,放入研磨球,通過研磨儀的高速上下振蕩帶動研磨珠進(jìn)行粉碎樣品。

  

  3.實(shí)驗(yàn)器材:上海凈信全自動組織研磨儀主機(jī),水稻葉片若干,離心管和不銹鋼研磨珠兩顆,提取試劑


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  水稻葉片樣品前處理研磨實(shí)驗(yàn)操作步驟:

  

  一、需要根據(jù)樣品量及樣品實(shí)驗(yàn)研磨需求,去對組織研磨儀設(shè)備的程序參數(shù)的研磨頻率及研磨時(shí)間進(jìn)行設(shè)置

  

  二、需要把水稻葉片剪成小段后,再放入凈信離心管中,再在離心管內(nèi)加入適量的氧化鋯珠和相應(yīng)提取試劑

  

  三、再把離心管放入機(jī)器的適配器中,但需要注意對適配器的配平和緊固,再鎖蓋


  四、啟動設(shè)備,即可開始程序的運(yùn)轉(zhuǎn)研磨


  五、待程設(shè)備程序停止運(yùn)轉(zhuǎn)后,即可完成樣品粉碎,便可獲得磨后的樣品效果

  

  水稻葉片樣品前處理研磨實(shí)驗(yàn)效果:

  

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  研磨前后效果圖

  

  注:全自動樣品快速研磨儀在針對樣品葉片的研磨時(shí),需要盡可能的添加提取試劑,讓樣品在實(shí)驗(yàn)研磨過程中有液體的情況下,可使樣品研磨效果會更加的充分。


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